نظرة عامة على تقنية استنساخ PCR
تحديث الوقت : 2020-08-12
المصدر:
الآراء : 71
الطرق التقليدية لتضخيم الحمض النووي:
الطريقة التقليدية لتضخيم الحمض النووي هي الاستنساخ الجزيئي ، والذي يتطلب بناء vecto r يحتوي على الجين المستهدف لإدخاله في الخلايا للتضخيم ، وتحقيقات للفحص ، بما في ذلك هضم الحمض النووي ، والربط ، والتحول ، والثقافة ، وتقنيات تهجين المسبار. على الرغم من عدم وجود صعوبات فنية ، إلا أن العملية معقدة ، والدورة طويلة ، ولا تساعد على الترويج.
مزايا تقنية استنساخ PCR:
تم اقتراح تقنية استنساخ PCR لأول مرة بواسطة Mullis في الولايات المتحدة في عام 1983 ، وتم اختراع تفاعل البوليميراز المتسلسل ، وهو طريقة تضخيم الحمض النووي البسيطة ، في عام 1985 ، مما يعني الولادة الحقيقية لتقنية استنساخ PCR.
اعتبارًا من عام 2013 ، تطور استنساخ PCR إلى تقنية الجيل الثالث. يمكن لتقنية استنساخ PCR تضخيم كمية صغيرة من شظايا الحمض النووي المستهدفة لملايين المرات.
تُستخدم تقنية استنساخ PCR على نطاق واسع في مجالات علم الأحياء الدقيقة والطب والزراعة وعلم الآثار بفضل حساسيتها العالية وخصوصياتها القوية وعائدها العالي وقابليتها للتكاثر الجيد وسرعتها وبساطتها.
لقد تم تعميمه في مختبرات مختلفة ، إلى حد كبير ، تم تبسيط تقنية الاستنساخ الجزيئي التقليدية ، بحيث يمكن للباحثين بسهولة تحليل وتحديد الجين المستهدف.
المبادئ الأساسية لتقنية استنساخ PCR:
يعتمد استنساخ تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) على استخدام الحمض النووي الذي يفسد الطبيعة ويصبح منفردًا عند درجة حرارة عالية تبلغ 95 درجة مئوية في المختبر.
في درجات حرارة منخفضة (عادة حوالي 60 درجة مئوية) ، يتم الجمع بين البادئات والخيوط المفردة وفقًا لمبدأ الاقتران التكميلي الأساسي ، ثم يتم تعديل درجة الحرارة إلى بوليميريز الحمض النووي الأمثل.
عند درجة حرارة التفاعل (حوالي 72 درجة مئوية) ، يقوم بوليميراز الدنا بتركيب السلسلة التكميلية على طول اتجاه حمض الفوسفوريك إلى خمسة سكر كربون (5'-3 ').
إن آلة PCR القائمة على البوليميراز هي في الواقع جهاز للتحكم في درجة الحرارة ، والذي يمكنه التحكم بشكل جيد في درجة حرارة التمسخ ، ودرجة حرارة إعادة التشبع ، ودرجة حرارة الاستطالة.
كطريقة أساسية في البيولوجيا الجزيئية ، تُستخدم تقنية استنساخ PCR على نطاق واسع في تطبيقات البيولوجيا الجزيئية مثل استنساخ الجينات وإعادة التركيب الجيني وتحليل تسلسل الحمض النووي والكشف الكمي للجينات. في الوقت نفسه ، تُستخدم تقنية استنساخ PCR أيضًا في الكشف عن الجينات الطبية المتعلقة بالورم ، والتشخيص المبكر للأمراض الوراثية ، وما إلى ذلك ، مما يوفر وسائل تقنية فعالة لتحديد الهوية الطبية وتحليل المخاطر.
يمكن لتقنية الاستنساخ الحاصلة على براءة اختراع لشركة Generalbiosystems أن تساعد العملاء على استنساخ الجين المستهدف إلى أي موضع محدد للناقل المطلوب دون الاعتماد على مواقع تقييد النواقل ، وإرضاء أفكار الاستنساخ المختلفة للعملاء ، وتوفير الوقت بشكل كبير مقارنة بوقت الاستنساخ العادي.
لاستنساخ شظايا جينية مختلفة من نفس الناقل ، يمكننا أيضًا إكمال خدمات الاستنساخ الفرعي عالية الإنتاجية بشكل فعال.- تطبيق وتطوير استنساخ PCR السابق:
- طريقة استنساخ PCR | ميزة | سلبيات التالى :
我是标题
Facebook
Twitter
Email