احتياطات لتنقية البروتين في خلايا الثدييات

يجب ألا تكون استراتيجيات تنقية البروتين المشتقة من خلايا الثدييات قادرة على التكاثر فحسب ، بل يجب أن تلبي متطلبات نقاء معينة وأشكالًا معينة ، ولكن أيضًا تقضي على الملوثات الضارة المحتملة التي قد تنشأ من عملية التحضير ، بما في ذلك البروتينات الحيوانية ، والفيروسات ، والفيروسات في الخلايا أو الثقافات. . الحمض النووي ، أو المضادات الحيوية لزراعة الخلايا ، إلخ. تحتاج الأمور التالية إلى الاهتمام:

① متطلبات النظافة ، يجب أن تكون جميع خطوات الفصل قادرة على العمل في ظل ظروف هادئة ، ويجب عدم إدخال حمولة حيوية أو سم داخلي.

يجب أن تكون المواد الخام المنقاة معقمة ، ويجب أن يكون محتوى الذيفان الداخلي منخفضًا جدًا ، ويجب عدم استخدام المضادات الحيوية.

② يجب تنظيف وإزالة مواد المعالجة التي لا يمكن تعقيمها بالبخار (مثل ناقلات الكروماتوغرافيا) بطرق أخرى فعالة.

تتضمن الطرق النموذجية المعالجة بمحلول مطهر مثل 0.2 ～ 0.5 مول / لتر هيدروكسيد الصوديوم أو إيثانول حمضي (60٪ إيثانول / 0.5 مول / لتر حمض أسيتيك) وهيدروكسيد الصوديوم / خليط إيثانول (مثل 50٪ إيثانول / 0.2 مول / لتر هيدروكسيد الصوديوم ). يمكن استخدامه ، ووقت العلاج بشكل عام 4-24 ساعة في درجة حرارة الغرفة.

③ تضمن سلامة العملية أن المنتج يمكن أن ينتقل مباشرة من خطوة تشغيل إلى أخرى ، دون عمليات إضافية في المنتصف ، وهو أمر مثالي.

④ بغض النظر عن القوة الميكانيكية أو ظروف الاستزراع غير المواتية ، تكون خلايا الثدييات أضعف بكثير من الخلايا الميكروبية ، لذلك يجب توخي الحذر للحفاظ على الخلايا سليمة.

من الضروري التحكم بعناية في ظروف الثقافة وفصل الخلايا لتجنب تلوث المنتج بالبروتينات داخل الخلايا التي يتم إطلاقها بسبب تحلل الخلية.