الصفحة الرئيسية > أخبار > اخبار الصناعة

خدمة التعبير المخصص للبروتين بدائية النواة

تحديث الوقت : 2021-02-24

المصدر:

الآراء : 24

خدمة التعبير المخصص للبروتين بدائية النواة
يستخدم نظام التعبير عن البروتين بدائية النواة عمومًا الإشريكية القولونية كخلية مضيفة. نظرًا لمزايا الانتشار السريع للخلايا ، والتعبير العالي ، والتنقية المريحة ، والاستقرار الجيد ، والقدرة القوية على مكافحة التلوث والتكلفة المنخفضة ، فإن نظام التعبير عن البروتين بدائية النواة هو الأكثر نضجًا وموثوقية ، وهو أيضًا الأكثر استخدامًا والأكثر اقتصادا نظام التعبير في تجارب التعبير البروتيني.
prokaryotic protein expression system
ومع ذلك ، فإن نظام التعبير عن البروتين بدائية النواة يواجه أيضًا بعض الصعوبات. على سبيل المثال ، يؤدي تفضيل استخدام الكودون لمنطقة ترميز الجين المراد التعبير عنه أو عدم توافق العناصر التنظيمية على الناقل مع البكتيريا المضيفة إلى عدم القدرة أو ضعف التعبير عن البروتين المستهدف ، وحتى البروتين المستهدف غير قابل للذوبان على الرغم من نجاح التعبير.

بمساعدة برنامج تحسين الكودون الرائد في الصناعة وخبرتنا التي تزيد عن عشر سنوات في تحسين البروتين وتنقية التعبير ، توفر لك شركة Generalbiosystems الدعم الفني الاحترافي في كل جانب من جوانب التعبير بدائية النواة ، وليس فقط ضمان التعبير عن البروتين المستهدف ، إنه يمكن أن تضمن أيضًا منتجات توصيل عالية النقاء وفقًا لاحتياجاتك ، مما يتيح لك التركيز على التجارب اللاحقة!

محتوى خدمة تعبير بروتين بدائية النواة مخصص


بناء ناقلات التعبير (اختياري)

بما في ذلك تحسين الكودون والتوليف الجيني والاستنساخ الفرعي.

بعد تحسين تسلسل الجينات بواسطة برنامج Generalbiosystems الرائد في الصناعة ، يمكن زيادة تعبير البروتين عدة مرات إلى عشرات المرات.

يمكن أن توفر شركة Generalbiosystems للعملاء مجموعة متنوعة من النواقل التجارية الشائعة ، مثل pET و pCOLD وما إلى ذلك. بالإضافة إلى ذلك ، تستخدم Generalbiosystems أيضًا وظائف بناء مكونات البيولوجيا التركيبية القوية لتحسين وتحويل سلسلة pSYNO من نواقل التعبير بدائية النواة بما في ذلك سومو و MBP و GST Trx وعلامات تعبير بدائية النواة أخرى لاختيارك. يرجى الاتصال sales@biolytic.cn للحصول على التفاصيل.


تحسين شروط التعبير

على فرضية أن التسلسل صحيح ، فإن سلالة المضيف لها تأثير واضح جدًا على تأثير التعبير.

تقوم Generalbiosystems بتحويل البلازميدات المؤتلفة إلى مجموعة متنوعة من البكتيريا المضيفة للتعبير ، بما في ذلك BL21 (DE3) و ArcticExpress (DE3) و Rosetta (DE3) pLySs و Rosetta-gami B (DE3) وسلالات مميزة أخرى.

بعد التحول ، اخترنا ما لا يقل عن 6 بلازميدات استنساخ إيجابية لاختبار التعبير والتحسين.

أثناء الاختبار الصغير ، سنقوم بتحسين واختبار ظروف الاستزراع المناسبة لسلالات مختلفة ، بما في ذلك عوامل مثل درجة الحرارة والوسيط ونوع المحفز ووقت الحث ومقدار الحث. اكتشف مستوى التعبير وقابلية الذوبان بواسطة SDS-PAGE ، وقدم اقتراحات جدوى حول ما إذا كان يجب توسيع نطاقه وتوسيع نطاقه.


تضخيم البروتين والتعبير عنه وتنقيته

محسنًا إلى جين شرط التعبير المناسب ، استخدم 1 لتر أو مقياس ثقافة أكبر للحث على التعبير عن البكتيريا المؤتلفة. بعد الثقافة والحث ، قم بإجراء تنقية تقارب من خطوة واحدة أو التبادل الأيوني ، وتنقية متعددة الخطوات مضادة للماء والهلام (اختيارية أو متعددة). بشكل افتراضي ، تكتشف SDS-PAGE النقاء ويكتشف Western blot صحتها (اختياريًا ، يوفر العملاء أجسامًا مضادة أولية تم التحقق منها).

المعالجة اللاحقة بالبروتين (اختياري)

بالنسبة للبروتينات ذات المتطلبات الخاصة الإضافية ، توفر لك شركة Generalbiosystems مجموعة متنوعة من خيارات ما بعد المعالجة ، بما في ذلك إزالة الملصق ، وتعقيم الترشيح ، وإزالة السموم الداخلية ، والتجفيف بالتجميد ، وتسلسل N-terminal وغيرها من الخدمات للبروتين النقي. لتلبية احتياجاتك الخاصة ، يمكن لمهندسينا ذوي الخبرة تزويدك بخدمات ما بعد مخصصة.