الصفحة الرئيسية > أخبار > اخبار الصناعة

ما هي عملية التعبير عن البروتين المؤتلف؟

تحديث الوقت : 2020-10-22

المصدر:

الآراء : 46

ما هي عملية التعبير عن البروتين المؤتلف؟

يمكن استخدام تقنية التعبير عن البروتين المؤتلف لتحليل تنظيم الجينات ودراسة بنية البروتين ووظيفته. سواء كان ذلك في البحث عن الوظائف في الجسم الحي أو الإنتاج على نطاق واسع للبحوث الهيكلية ، وكذلك تطوير الأدوية في مجال العلاج الحيوي ، فإن تكنولوجيا التعبير عن البروتين مطلوبة.


فيما يلي بعض نقاط المعرفة الخاصة بتعبير البروتين التي لخصتها الأنظمة الحيوية العامة .

مسار تخليق البروتين العام :

DNA -> mRNA—> بروتين

عملية التشغيل الفعلية هي:

1. استنساخ أو توليف الجين المستهدف

2. بناء ناقلات

3. التعبير عن البروتين وتنقيته

4. التعبير الشامل وتنقية البروتين (أو لا شيء)


استنساخ أو توليف الجين المستهدف

يشتمل ناقل تعبير البروتين النموذجي على 4 عناصر رئيسية على الأقل:


• مربع التعبير الجيني المستهدف (بما في ذلك المحفز وإنهاء الجين أو إشارة بولي (A))

• أصل تكاثر البكتيريا (أوري)

• مربع اختيار المضادات الحيوية لمضيف معين (مثل هيجرومايسين ب ، حمض الميكوفينوليك ، بوروميسين ، بلاستيدين إس ، إلخ)

• مربع اختيار المضادات الحيوية للإشريكية القولونية (مثل الأمبيسلين ، البلاستيدين S ، الكاربينيسيلين ، مقاومة زيوسين للمضادات الحيوية الانتقائية ، إلخ.)


تشمل المكونات الأخرى:

• موقع استنساخ متعدد (MCS) (أي رابط متعدد القيود)

• علامات Epitope

• إشارة إفراز

• موقع التعرف على البروتياز

• موقع إدخال الريبوسوم الداخلي (IRES)


العديد من حالات التعبير عن البروتين الشائعة

تعبير البروتين هو المحتوى الرئيسي للعديد من الموضوعات التجريبية. نظرًا لاختلاف مجالات البحث ونواقل التعبير المختلفة ، تختلف خصائص البروتين التي يريد كل شخص التعبير عنها اختلافًا كبيرًا.

خاصة أن بعض الشركاء الصغار يعملون على هذا الموضوع لأول مرة. إن كيفية التعبير عن البروتين وكيفية ترتيب الإجراءات التجريبية أمر أكثر إرباكًا.

فيما يلي أكثر مخططات التعبير عن البروتين المؤتلف شيوعًا وفقًا لمتجهات التعبير المختلفة.

قارن كل حالة تعبير بروتين من الخطوات التجريبية والوقت المطلوب والأهداف التي يجب إكمالها في كل خطوة. يمكنك مقارنة المحتوى التجريبي الخاص بك وتأمل أن يساعدك.

 

تعبير البروتين الشائع الاستخدام (بما في ذلك إعداد خط الخلية):

• تطوير خط الخلية المستقر CHO

• تطوير خط الخلية المستقر HEK293

• التعبير البروتيني بدائية النواة

• تعبير عابر في خلايا الثدييات

• بروتين الخميرة

• Baculovirus وتعبير بروتين الخلية الحشرية

مقارنة بين التعبير البروتيني المختلف

وقت اكتمال خطة التجربة المذكورة أعلاه هو وقت عملية العمل لمختبر أكثر نضجًا ، ويمكنك استيعابها بمرونة وفقًا لترتيب التجربة الخاصة بك.

لتحقيق الهدف ، يجب عليك أيضًا إجراء الإضافات والتخفيضات المناسبة بناءً على متطلبات الموضوع الخاصة بك.

إذا كان لديك موضوع بحث واسع النطاق نسبيًا ، وكان التعبير عن البروتين جزءًا فقط من الموضوع بأكمله ، يمكن للنظم الحيوية العامة توفير خدمات التعبير البروتيني المتنوعة المذكورة أعلاه.  

المزايا التقنية العامة للنظم الحيوية :

ناقلات التعبير عالية الكفاءة

زراعة الخلايا عالية الكثافة

صيغة الثقافة المتوسطة مع حقوق الملكية المستقلة

> 6000 بروتين في التعبير والتنقية والإنتاج

تضمين تكنولوجيا إعادة تشبع بروتين الجسم والتعبير القابل للذوبان