الصفحة الرئيسية > أخبار > اخبار الصناعة

كيف تتعامل مع المشاكل التي تواجهها أثناء تخليق الجينات؟

تحديث الوقت : 2020-12-23

المصدر:

الآراء : 24

كيف تتعامل مع المشاكل التي تواجهها أثناء تخليق الجينات؟
سؤال: في أي ظروف أحتاج إلى إجراء تخليق جيني كامل؟
الجواب: يمكن استخدام التخليق الجيني الكامل في الحالات التالية
(1) تحسين التعبير عن الجينات الأجنبية من خلال تحسين الكودون.
(2) التسلسل معروف ، لكن من الصعب الحصول على الجينات من العينات البيولوجية.
(3) جينات ذات ظروف تعبير قاسية ووفرة تعبير منخفضة للغاية.
(4) مختلف الجينات المصممة صناعيا.
(5) ريبوزيمات مصطنعة.
(6) كمية كبيرة من (كدنا) لرقائق الحمض النووي.
(7) تعديلات اصطناعية مختلفة على الجينات.


سؤال: كم من الوقت يمكن تصنيع جين كامل؟

الجواب: لا يوجد حد للطول من الناحية النظرية. ومع ذلك ، نظرًا لعوامل مثل تقنية الاستنساخ ، وسعة الناقل ، وما إلى ذلك ، فإن طول تخليق الجين الكامل لا يتجاوز عمومًا 10 كيلوبايت. يمكننا إكمال تخليق الجينات بالكامل أقل من 10 كيلوبايت.


سؤال: ما نوع شركات النقل المجانية التي يمكن أن توفرها Nupu Biotech؟

الإجابة: لدينا بشكل أساسي ناقلات تجارية شائعة ، مثل ناقلات سلسلة PET وناقلات pEGFP وناقلات تغليف الفيروسة البطيئة وناقلات siRNA وما إلى ذلك. يمكننا أيضًا قبول النواقل التي يوفرها العملاء للاستنساخ.


السؤال: هل تحسين الكودون ضروري؟

الجواب: بالنسبة للجينات المستخدمة لتعبير البروتين ، فهو ضروري في معظم الحالات. على سبيل المثال ، تحتاج الجينات من حقيقيات النوى إلى التعبير عنها في بدائيات النوى. نظرًا لأن تفضيل الكودون لحقيقيات النوى يختلف تمامًا عن تفضيل بدائيات النوى ، فإن تحسين الكودون للجينات سيحسن بشكل كبير من كفاءة التعبير. أبلغ بعض العملاء أن التسلسل المحسن كان 3-5 مرات أعلى من التسلسل الأصلي.


سؤال: كم من الوقت يستغرق التركيب الجيني الكامل؟

الإجابة: بالنسبة للأجزاء التي تقل عن 500 نقطة أساس ، يبلغ متوسط دورة التركيب 10 أيام عمل. بالنسبة للأجزاء التي تتراوح من 500 إلى 1000 نقطة أساس ، يبلغ متوسط دورة التركيب 12 يوم عمل. لكل 1 كيلوبايت إضافي من الأجزاء الأطول ، يزداد متوسط الوقت المطلوب بمقدار 7 أيام عمل.


سؤال: ماذا لو احتجت إلى الاستنساخ في نواقل أخرى؟

الإجابة: شركة Generalbiosystems —— يمكن لشركة Genthesis Service Company مساعدتك في توصيل الجين الكامل المركب بالناقل الذي تهتم به مجانًا (تحتاج إلى توفير معلومات الناقل والناقل المقابلة عند تقديم طلب). يمكننا أيضًا توفير مجموعة متنوعة من ناقلات التعبير حقيقية النواة وبدائية النواة مجانًا. نرحب بك للاتصال بموظفي خدمة العملاء لدينا للاستفسار.


سؤال: ما هي خطوات التركيب الجيني الكلي؟

الجواب: يشمل التركيب الجيني الكامل: تصميم وتوليف البادئات ؛ تسلسل الربط PCR ؛ الاستنساخ في ناقلات ؛ التحقق من التسلسل.


سؤال: هل يجب أن أختار التخليق الجيني الكامل أم استنساخ PCR؟

الإجابة: يحتاج استنساخ PCR إلى استخراج الحمض النووي الريبي من الأنسجة أو الخلايا التي تعبر عن الجينات ، والنسخ العكسي إلى cDNA ، ثم تضخيم الجين المستهدف من cDNA. ليس من السهل تعديل الجين المستهدف الذي تم الحصول عليه ، ويجب الحصول على أي متحولة من خلال خطوات الطفرات اللاحقة.

يعد تحسين Codon أكثر استحالة. يتمثل أحد القيود الرئيسية الأخرى لاستنساخ PCR في أنه من الصعب استنساخ جينات خاصة بنجاح مثل الجينات ذات الوفرة التعبيرية المنخفضة والجينات ذات وقت التعبير القصير للغاية. وبالمقارنة ، فإن التخليق الجيني الكامل هو طريقة استنساخ أكثر مرونة ونجاحًا وأرخص.